
分光光度法是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的来自吸光度或发光强度,对该物360百科质进行定性和定量分析的方法。
在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射司始别未深到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。如以波长(λ)为横坐标耐足等怕查终与望,吸收强度(A)为纵坐标,就可绘出该物质的孔八伯盐季吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法,称为分光光度法,也称为吸收光谱法。用紫外光源测定无磁色物质的方法,称为紫外分光光度法;用可见光光源测定有色物质的方蛋查法,称为可见光光笔布意乐无命喜度法。它们与比色法一样,都以Lambert-Beer定律为基础。 上声境口述的紫外光区与可见光区是常用的。但分光光度法的应用光区包括紫外光区,可见光区,红外光区。
紫外分光光度计,可见分光光度也袁计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。
- 中文名 分光光度法
- 外文名 spectrophotometry(缩写为SP)
- 类型 物理研究方法
- 作用 物质进行定性和定量的分析
- 常用光区 紫外光区与可见光区
简介
在分光光度计中,将不同波长的光连续地照射到一定浓度的样品溶液时,便可得到与不同波长相对应的吸收强度。如以波长(λ)为横坐标,吸收强度(A)为纵坐标,就可绘出该物质的吸收光谱曲线。利用该曲线进行物质定性、定量的分析方法,称为他字肉香旧织总去最球分光光度法,也称轴争众对散庆送叶为吸收光谱法。用紫外光源测定无色物质的方法,称为紫外分各背乎两需技妈风所热杂光光度法;用可见光光源测定有色物质的方法,称为可见光光度法。它们与比色法一样,都以Beer-Lambert定律为基础。 上述的紫外光区与可见光区是常用的副福哪少口。但分光光度法的应用光区包括紫外光区,可来自见光区,红外光区。波长360百科范围
(1)200~400nm的紫外光区
(2)400~760nm坐探危州减的可见光区, (3)2.5~25μm(按波数计为4000cm<-1>~400cm<-1>)的红外光大植容茶型角握既某区。
检测仪器
紫外分光光度计,可见分光光度计(或比色计)、红外分光光度计或原子吸收分光光度计。为保证测量的精密度和准确度,所有仪器应按照国家计量检定规程或本附录规发攻临渐可食液乙而判味定,定期进行校正检定。
基本原理
当一束强度为I0的单色光垂直照射某物质的溶液后,由于一部分光被体系吸收,因此透射光的强度降至I,则溶液的透光率T为:T=(I0-掉钱I)/I0
根据朗伯(Lambert)-来自比尔(Beer)定律:
A=abc
式中A为吸光度,b为溶液层厚度(cm360百科),c为溶液的浓度(g/dm^3), a为吸光系喜数。其中吸光系数 与溶液的本性降拿快、温度以及波长等因素有关。溶液中其他组分(如溶剂等)对光的吸收可用空白液扣除。
由上式可知,当溶液层厚度b和吸光系数a固定时,吸光度A与溶液的浓度成线性关系。在定量分析时,首先需要测定溶液对不同波长光的吸收情况(吸收光谱),从中确定最大吸收波长 ,然后以此波长 的光为光源,测定一系列已知浓度c溶液的诉底落吸光度A,作出A~c工作曲线甲守黄河绍难让没。在分析未知溶液时,根据测吃浓移试宜办清员量的吸光度A,查工作预以曲线即可确定出相油液件化应的浓度。这便是分光光度法测量浓度的基本原理。

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